Banca de DEFESA: Ana Caroline Chaves Vall Nicolás

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Ana Caroline Chaves Vall Nicolás
DATA : 04/03/2024
HORA: 09:00
LOCAL: on-line google meet
TÍTULO:

EFEITO DAS CONDIÇÕES DA INJEÇÃO NA EFICIÊNCIA DA TRANSFERÊNCIA INTRAFOLICULAR DE OVÓCITOS IMATUROS (TIFOI)

PALAVRAS-CHAVES:

Injeção; Folículo; Embriões bovinos; Complexo cumulus-ovócito. 

PÁGINAS: 79
RESUMO:

A Transferência Intrafolicular de Ovócitos Imaturos (TIFOI) apresenta resultados insatisfatórios para sua utilização em escala comercial, sendo que seus problemas podem ocorrer em qualquer uma das etapas envolvidas. Neste estudo foi avaliado se as condições da injeção afetam a recuperação final de embriões. Na primeira etapa, avaliou-se in vitro as melhores condições de injeção para aumentar a recuperação ovocitária, mantendo sua qualidade após TIFOI. Quatro agulhas diferentes (27G Gengival (27G G), 27G WTA® (27G W), 27G Raquidiana (27G R) e 30G Gengival (30G G); dois volumes de meio PBS (10 e 20 µl) e duas quantidades (25 e 50) de complexos cumulus-ovócitos (CCOs) foram avaliados. Os ovários foram coletados em abatedouros e folículos > 9 mm foram utilizados para os experimentos. No momento da injeção, avaliou-se a resistência na penetração no folículo (1, 2 ou 3), o refluxo a partir do orifício causado pela injeção (1, 2 ou 3) e se ficaram CCOs retidos no sistema (% de retenção). Em seguida, os folículos injetados foram aspirados e foram avaliadas as taxas de recuperação e desnudamento dos CCOs. Primeiramente comparou-se as quatro agulhas utilizando 20 µl e 25 CCOs. As agulhas 30G G (84,0%) e 27G G (66,5%) apresentaram taxas de desnudamento maiores (P <0,05) do que a 27G R (27,0%) e a 27G W (34,1%) e foram, portanto, excluídas da próxima etapa. Posteriormente, as agulhas 27G R e 27G W foram utilizadas para avaliar o efeito do volume de meio (10 ou 20 µl) e da quantidade de CCOs (25 e 50 CCOs). Ao avaliar somente o efeito da agulha, foi possível observar menor taxa de desnudamento com a agulha 27G R. Além disso, quando foi utilizada a 27G R, houve efeito do volume na taxa de recuperação (P <0,05), sendo maior com 10 µl (85,82%) do que com 20 µl (70,05%). Além disso, a maior taxa de retenção foi observada quando 27G W foi usada com 25 CCOs em 10 µl. Portanto, a agulha 27G R com 10 μl foi a mais indicada para a TIFOI. Na avaliação in vivo, foi testada a agulha 27G R com 25 (tratamento T25) ou 50 CCOs (tratamento T50) em gota de de 10 µl de PBS. No momento da TIFOI, a qualidade da injeção foi classificada em graus de 1 (melhor) a 3 (pior). Simultaneamente, grupos de 25 a 30 CCOs foram destinados à maturação, fecundação e cultivo embrionário in vitro (MIV controle). Após oito dias, foi realizada a lavagem uterina das ovuladoras e a avaliação da taxa de recuperação de estruturas e de embriões sobre o total de ovócitos injetados. Os embriões recuperados foram avaliados quanto ao diâmetro e número total de células foram comparados com os do grupo MIV Controle.  Os resultados indicam que recuperação de estruturas e embriões foi semelhante entre os grupos, entretanto a recuperação de embriões foi afetada pela qualidade da injeção, sendo semelhante entre "T25_1" (7,6%) e "T50_1" (6,1%), mas menor com "T50_2" (1,0%). A qualidade dos embriões TIFOI semelhante aos PIV, considerando que apresentavam tamanho (TIFOI – 175,0 nm e PIV – 179,1 nm) e número de células (TIFOI – 124,2 e PIV – 141,3) semelhantes. Pode-se concluir que a agulha 27G R com 10 μl é a mais indicada para ser utilizada em IFOT, pois apresenta as maiores taxas de recuperação, mantendo a qualidade dos CCOs. Além disso, o número de CCOs injetados não afeta a recuperação de estruturas ou embriões após a TIFOI. No entanto, injeções de melhor qualidade apresentaram maior chance de recuperação de embriões. Ademais, a comparação entre os embriões gerados pelas técnicas TIFOI e PIV revelou similaridade no diâmetro embrionário e número de blastômeros, sugerindo uma equivalência na qualidade embrionária, com base nesses parâmetros.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - ***.928.980-** - MARGOT ALVES NUNES DODE - EMBRAPA
Interno - 1806685 - IVO PIVATO
Externo à Instituição - CARLOS FREDERICO MARTINS - EMBRAPA
Externo à Instituição - JOSE FELIPE WARMLING SPRICIGO - UFG